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H2S 含量測定試劑盒說明書

提 供 商: 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司 資料大?。?/td>
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詳細(xì)介紹

H2S 含量測定試劑盒說明書

注意:正式測定之前選擇預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗

規(guī)格: 100T/96S

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 10mL×1  瓶,4℃保存。

試劑:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。

試劑:液體 1mL×1 管,4℃避光保存。

標(biāo)準(zhǔn)品粉劑 3mg×1 管,4℃避光保存

產(chǎn)品說明:

 

微量

 

H2S 是一種新型氣態(tài)信號分子,存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì),生理濃度的 H2S 對神經(jīng)系統(tǒng)海馬的

長時程增強功能具有重要的調(diào)節(jié)作用,并對自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。

H2S 與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán),亞甲基藍(lán)在 665nm 有大吸收峰,通過測定其吸光值可計算 H2S 含量。

需自備的儀器和用品:

天平、低溫離心機、可見分光光度計或酶標(biāo)儀、微量比色皿96孔板、蒸餾水。

操作步驟:

一、樣品處理:

a. 組織:按照組織質(zhì)量g:提取液體積(mL)15~10  的比例建議稱取約 0.1g  組織,加入 1mL

提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后 10000g4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

b. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量10 4 :提取液體積mL500~10001 的比例(建議 500 細(xì)胞加入 1mL  提取液,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3  秒,間隔 7 秒,總時間 3min;然后 10000g4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。

c. 血清(漿:直接測定。

、測定步驟: (取 1.5ml 離心管,按照下表操作)

 

空白管

測定管

標(biāo)準(zhǔn)管

樣品(μL)

 

50

50

蒸餾水(μL)

50

 

 

d. 臨用前將標(biāo)準(zhǔn)品加入1ml試劑一充分溶解則為12.5μmol /mL H2S標(biāo)準(zhǔn)品溶液,稀釋100倍后為0.125μmol /mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液

 

 

試劑一(μL)

50

50

50

充分震蕩混勻

 

試劑二(μL)

50

50

50

充分震蕩混勻

試劑三(μL)

50

50

50

充分震蕩混勻

試劑四(μL)

10

10

10

12000rpm,4℃,離心 10min,取200μl上清混勻,25℃靜置20min,于比色皿中,測定665nm吸光值,記為A空白、A測定、A標(biāo)準(zhǔn)。

三、H2S 含量計算公式:

  • 按蛋白濃度計算

H2S含量(μmol /mg prot=0.125×(A測定-A空白)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白) ÷Cpr

  • 按樣本質(zhì)量計算

H2S含量(μmol /g)=0.125×(A測定-A空白)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白) ÷W

  • 按細(xì)胞數(shù)量計算

H2S含量(μmol /104 cell)=0.125×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷細(xì)胞數(shù)量

  • 按照液體體積計算

H2S含量(μmol /mL)=0.125×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

 

 

注意事項:如樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品OD,可稀釋樣本或增大標(biāo)準(zhǔn)品濃度

Taqman探針報價

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號

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