CCK-8試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的試劑盒，其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡(jiǎn)練、作用區(qū)分客觀等要素，適宜于大規(guī)模篩查實(shí)驗(yàn)又能夠用于少數(shù)標(biāo)本的檢查，能夠做定性實(shí)驗(yàn)也能夠做定量分析。
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。
CCK-8試劑盒的實(shí)驗(yàn)小貼士：
1、在收到試劑盒后，為保證檢測(cè)效果，需要根據(jù)說(shuō)明書(shū)中保存條件正確儲(chǔ)存。除非特別注明，試劑盒大多是在2～8°C條件下儲(chǔ)存；
2、在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，請(qǐng)確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說(shuō)明書(shū)一致，再進(jìn)行后續(xù)操作；
3、溶解標(biāo)準(zhǔn)品過(guò)程中，注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮，過(guò)程中要避免產(chǎn)生泡沫；
4、為了避免交叉污染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽；
5、每次孵育時(shí)，正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；
6、正確洗板有助于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性；
7、TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無(wú)色，請(qǐng)避光保存。加入孔板后，將由無(wú)色變成不同程度的藍(lán)色；
8、終止液上板順序需與底物上板順序一致，加入終止液，溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色，即表明終止液與底物未混勻，請(qǐng)充分混合。
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