葡聚糖凝膠通過羥丙基化制備，并且專門適合用于有機溶劑分離嗜脂性分子，天然產(chǎn)物在有機溶劑中的純化，例如類固醇，萜類化合物，脂質(zhì)和低分子量肽。
葡聚糖凝膠 LH-20 洗脫溶劑：
葡聚糖凝膠 LH-20 洗脫溶劑分為兩類：反相和正相兩種。用得最多的是反相溶劑洗脫，以甲醇——水系統(tǒng)最為常見，先用水，逐漸增加甲醇比例，最后用 100％甲醇沖柱。正相系統(tǒng)以氯仿——甲醇最為常見，先用 50％氯仿——甲醇，逐漸增加甲醇比例，最后用 100％甲醇沖柱。
樣品的處理和洗脫溶劑的選擇：
如果樣品極性大，選用反相溶劑洗脫（甲醇——水），樣品用最少體積的甲醇——水（盡可能甲醇少一些）溶解，過濾后，濕法上樣（必須要進(jìn)行過濾！否則把葡聚糖凝膠 LH-20 堵塞，就必須將葡聚糖凝膠 LH-20 的柱頭部分棄去， 造成不必要的浪費） 。如果樣品極性小， 這選用正相溶劑洗脫 （氯仿——甲醇） ，樣品用最少體積的氯仿——甲醇溶解，過濾后，濕法上樣。
葡聚糖凝膠 LH-20 的使用方法：
將干粉浸泡于 60-70％乙醇中（充分?jǐn)嚢瑁?，洗去可能存在的殘留物，抽干然后濕態(tài)不間隙裝柱，絕對不能出現(xiàn)凝膠斷層（否則要重新裝柱），動態(tài)用一倍柱體積的 60-70％乙醇淋洗，再用水洗凈乙醇即根據(jù)自己選用洗脫液平衡層析柱至少兩個柱體積直到基線變得平穩(wěn)為止，如改變?nèi)軇?yīng)該注意凝膠在新溶劑中的溶脹性質(zhì)，并根據(jù)性質(zhì)確定柱高。如使用相同的溶劑，在以后的層析中柱平衡可以省略。
執(zhí)照.jpg)
