| 更新時間： | 2023-10-10 |
| 型 號： | |
| 所屬分類： | 分子生物學(xué)實驗 |
| 報 價： | 1200 |
承接實驗外包服務(wù)：一、分子生物學(xué)檢測服務(wù)二、病理形態(tài)學(xué)檢測三、蛋白質(zhì)技術(shù)服務(wù)1、免疫印跡（Western-blotting）分析2、蛋白質(zhì)組學(xué)3、凝膠遷滯實驗（EMSA）分析DNA或RNA結(jié)合蛋白四、免疫學(xué)檢測服務(wù)五、代謝組學(xué)1、GC-MS、LC-MS、NMRTaqman探針生物學(xué)實驗
服務(wù)項目 | 終端報價 | 說明 | 實驗周期 |
SYBR Green染料法（單孔） | 80元/例/基因 | 包含引物設(shè)計合成、提取、逆轉(zhuǎn)錄、擴增.內(nèi)參免費（多樣本多基因可優(yōu)惠6-8折） | 1至2周內(nèi) |
SYBR Green染料法（兩重復(fù)） | 100元/例/基因 | ||
SYBR Green染料法（三重復(fù)） | 120元/例/基因 | ||
DNA提取 | 30元/樣本 | 包含濃度測定 | 1周內(nèi) |
RNA提取 | 35元/樣本 | ||
miRNA定量檢測（單孔） | 90元/例/基因 | 包含引物設(shè)計合成、提取、逆轉(zhuǎn)錄、擴增.內(nèi)參免費 | 1至2周內(nèi) |
lcnRNA定量檢測（單孔） | 90元/例/基因 | ||
siRNA合成 | 1000元/條 | 包含siRN及NC各一條 | 2至3周內(nèi) |
Taqman探針 | 1200元/條 | 包含探針一條及上下游引物一對 | 1至2周內(nèi) |
SNP檢測 | 100元/例/位點 | 包含DNA提取、擴增、測序 | 2至3周內(nèi) |
實驗意義
熒光定量PCR (Realtime fluorescence quantitative PCR, qPCR)也稱作實時熒光定量PCR。就是在PCR的擴增過程中，通過熒光的信號，對PCR的進程進行實時的定性、定量檢測， 后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對初始模板進行定量分析的方法。
檢測方式有SYBR Green染料法和Taqman探針法兩種方式。
探針法與染料法的優(yōu)缺點
1.探針法通過探針可以增加反應(yīng)收集信號的特異性，只有探針結(jié)合的片段上發(fā)生擴增才能收集到信號，能夠用多重體系反應(yīng)的方法，能夠預(yù)測和提前進行反應(yīng)條件的優(yōu)化,缺點是要合成探針，成本高，周期長。
2.染料法經(jīng)濟實惠，可以做溶解曲線，分析全部PCR產(chǎn)物的TM值，缺點就是特異性沒有探針法好。
實驗標(biāo)本收集及保存方法：
1：病理標(biāo)本收集及保存：
1）冰凍切片：取下適當(dāng)?shù)慕M織塊放于液氮保存；
2）石蠟切片：取下適當(dāng)?shù)慕M織塊放于4%多聚甲醛保存；
3）細胞爬片：細胞爬片4%多聚甲醛固定30min，換PBS浸沒4℃保存。
2：分子生物學(xué)標(biāo)本收集及保存：
1）新鮮組織：切割標(biāo)本后放于液氮或者-80℃冰箱保存；
2）石蠟標(biāo)本：常溫保存；
3）全血標(biāo)本：取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管；
4）體液標(biāo)本：高速離心取沉淀；
5）細胞標(biāo)本：細胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
3：蛋白質(zhì)實驗標(biāo)本收集及保存：
1）新鮮組織：切割標(biāo)本后放于液氮或者-80℃冰箱保存；
2）全血標(biāo)本：取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管；
3）細胞標(biāo)本：細胞加細胞裂解液充分裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
4：ELISA、放免、生化實驗標(biāo)本收集及保存：
1）血清（血漿）樣本：取全血加入促凝管（抗凝管），2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，收集上清，液氮或者-80℃冰箱保存；
2）尿液樣本：樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，液氮或者-80℃冰箱保存；胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液參照此實行；
3）細胞樣本：檢測分泌性的成份時，樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，液氮或者-80℃冰箱保存；檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS稀釋細胞懸液，通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，收集上清同上；
4）組織樣本：切割標(biāo)本后，稱取重量，用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆?/span>。
5：代謝組學(xué)標(biāo)本收集：
1）尿液樣本：樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，液氮或者-80℃冰箱保存；胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等參照此實行；
2）組織樣本切割標(biāo)本后，稱取重量，用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆?/span>；
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